多功能酶标仪插拔式滤光片原理

多功能酶标仪插拔式滤光片的原理是基于不同材料和不同厚度的滤光片对特定波长的光线进行滤波或衰减。当激发光源照射到样本中后，所得的荧光或吸收光在经过滤光片时，只会留下符合滤光片的通量。因此，更换不同波长的滤光片可以选择特定区域内的荧光或吸收光，以检测需要的信号。在多功能酶标仪中，插拔式滤光片设有光路切换和自动识别功能，可以自动检测滤光片的类型和数量，并根据选择的检测项目自动设定检测波长，提高了检测的准确性和效率。

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酶标仪原理_酶标仪使用说明

酶标仪的检测原理

光是电磁波，波长100nm～400nm称为紫外光， 400nm～780nm之间的光可被人眼观察到，大于780nm称为红外光。人们只所以能够看到色彩，是因为光照射到物体上被物体反射回来。绿色植物之所以是绿色，是因为植物吸收了光中的红色光谱。酶标仪测定的原理是在特定波长下，检测被测物的吸光值。

检测单位：

光通过被检测物，前后的能量差异即是被检测物吸收掉的能量，特定波长下，同一种被检测物的浓度与被吸收的能量成定量关系。

检测单位用OD值表示， OD是optical delnsity（光密度）的缩写，表示被检测物吸收掉的光密度， OD＝1og（1／trans），其中trans为检测物的透光值。根据Bouger-amberT-beer法则，OD值与光强度成下述关系：

E＝OD=logΙ0/Ι其中E表示被吸收的光密度， Ι0 为在检测物之前的光强度，Ι为从被检测物出来的光强度。

OD值由下述公式计算：

E＝OD=C×D×E

C为检测物的浓度

D为检测物的厚度

E为摩尔因子

在特定波长下测定每一种物质都有其特定的波长，在此波长下，此物质能够吸收最多的光能量。如果选择其它的波长段，就会造成检测结果的不准确。因此，在测定检测物时，我们选择特定的波长进行检测，称为测量波长。

但是每一种物质对光能量还存在一定的非特异性吸收，为了消除这种非特异性吸收，我们再选取一个参照波长，以消除这个不准确性。在参照波长下，检测物光的吸收最小。检测波长和参照波长的吸光值之差可以消除非特异性吸收。

Anthos 酶标仪检测值计算

仪器中的检测器接收透过被检测物的光能量，转换成二进位数字信号，最大为4095。仪器定义没有光源下的透光值为 0％，没有检测物的透光值为100％。则实际检测中，检测物的透光值均在 0％一100％之间。透光值

的计算如下：

T＝（Meas—Min）／（Max—Min）

其中T为透光值， Meas为检测的二进位数值， Min为在 0％的情况下检测的二进位数值， Max为在100％的情况下检测的二进位数值，举例如下：

MaX=3600 Mn=20 Meas＝30

T=（30-20）/3600-20)＝0．0028

OD＝1og（1/T）=1og（1/0.0028）=2.552

Anthos 酶标仪的中心定位

仪器会自动对酶标孔进行中心定位，中心定位是要消除酶标孔底的凸凹引起的厚薄不均带来检测的不准确。在对每一个酶标仪进行检测时，仪器其实要进行35个点的测量，选取最中间的5个点的均值为本孔的OD值。

光源的参照通道

参照通道是用来校准由于电压不稳或灯泡磨损带来的影响。

酶标仪的用途和其它提示

用于ELISA试剂的测定，广泛用于各种实验室，包括临床实验室。

质量控制

质量控制是试剂检测的重要因素。请按照试剂说明书的要求进行质量控制。 空白校正

有一些试剂盒的说阴书将空白孔设置为空气，其它大多数空白孔的设置是用试剂来设置的，请按照试剂盒的说明书要求进行。

检测结果的解释

由于有相当多的因素会影响检测的结果，如不同的酶标板，检测试剂的体积，都会造成OD值的不，因此，只有使用同一酶标板反应的试剂检测结果才能比较和分析。对结果的临床解释请依照试剂盒的说明书进行。

酶标仪的使用注意事项

1、工作环境

酶标仪是一种精密的光学仪器，因此良好的工作环境不仅能确保其准确性和稳定性，还能够延长其使用寿命。根据DIN VDE 0871条例，仪器应放置在无磁场和干扰电压的位置。依据DIN 45 635 －19条例：

仪器应放置在低于40分贝的环境下。

为延缓光学部件的老化，应避免阳光直射。

操作时环境温度应在15℃－40℃之间，环境湿度在15％－85％之间。

操作电压应保持稳定。

操作环境空气清洁，避免水汽，烟尘。

保持干燥、干净、水平的工作台面，以及足够的操作空间。

2、操作注意事项

酶标仪的功能是用来读取酶联免疫试剂盒的反应结果，因此要得到准确结果，试剂盒的使用必须规范。许多医院在使用酶标仪之前是通过目测判断结果，操作过程随意性较大，在使用酶标仪后如果不能及时纠正操作习惯，会造成较大误差。在酶标仪的操作中应注意以下事项：

使用加液器加液，加液头不能混用。

洗板要洗干净。如果条件允许，使用洗板机洗板，避免交叉污染。

严格按照试剂盒的说明书操作，反应时间准确。

在测量过程中，请勿碰酶标板，以防酶标板传送时挤伤操作人员的手。

请勿将样品或试剂洒到仪器表面或内部，操作完成后请洗手。

如果使用的样品或试剂具有污染性、毒性和生物学危害，请严格按照试

剂盒的操作说明，以防对操作人员造成损害。

如果仪器接触过污染性或传染性物品，请进行清洗和消毒。

不要在测量过程中关闭电源。

对于因试剂盒问题造成的测量结果的偏差，应根据实际情况及时修改参数，以达到最佳效果。

使用后盖好防尘罩。

出现技术故障时应及时与厂家联系，切勿擅自拆卸酶标仪。

酶标仪及洗板机选购指南

酶标仪（Microplate Reader）是对酶联免疫检测（ EIA）实验结果进行读取和分析的专业仪器。酶联免疫反应通过偶联在抗原或抗体上的酶催化显色底物进行的，反应结果以颜色显示，通过显色的深浅即吸光度值的大小就可以判断标本中待测抗体或抗原的浓度。 酶标仪广泛地应用在临床检验、生物学研究、农业科学、食品和环境科学中，特别在近

几年中，由于大量的酶联免疫检测试剂盒的应用，使得酶标仪在生殖保健领域中应用越来越广泛，同时促进了生殖健康技术水平提高 。

目前国内许多计生站系统开展了酶免检测项目，如：乙肝五项、爱滋病检测、优生优 育系列检测、激素检测等。过去多数采用目测方法，报出的结果缺乏科学的依据。例如：某弓形虫检测试剂盒中，临界值规定为：阴性对照品的 OD 值×2.5，通过目测无法判断标本孔的反应颜色是否超过临界值。肉眼进行两孔之间的颜色比较可能还行，但比较一孔的颜色是否超过另一孔颜色的2.5倍就不可能。

国内多家权威机构，如卫生部临床检验中心和计划生育系统等多次强调酶标仪的重要性，并要求酶联免疫检测试剂应使用酶标仪判读，酶免试剂的质控也应使用酶标仪，并提供酶标仪测定的原始数据，而各厂家的试剂盒说明书没有是让用目测的。同时酶免检测的 项目往往是一些实质性的感染和病变（如：肝炎、爱滋病、优生优育等），判读更要求严谨，由误诊引起的纠纷很难处理。另外，住院手术病人术前的丙肝、爱滋等 EIA 试剂检测是避免因输血引起感染引发的医疗事故纠纷的必要手段，正逐渐被许多单位所采用。

我国免疫诊断方法主要有如下三种：酶免（EIA）、放免（RIA）和发光，在市场上的情况如下：

方法 所处市场周期

放免 衰退期

酶免 成长期

发光 进入期

放免技术由于试剂的污染和有效期等问题在国际和国内市场逐渐被淘汰，而化学发光试剂和设备比较昂贵，使得其在国内的普及特别在计生系统普及需要较长时间，EIA 技术稳定，试剂价格合理，供应充，酶免技术在中国市场处于成长期，因此购买酶标仪正合适宜。 尤其要提到的是，在中国的计划生育和妇幼保健系统配备酶标仪已经迫在眉睫。早在几年以前, 世界卫生组织已建议对孕妇进行 TORCH五项常规筛查，但是遗憾的是由于缺乏酶标仪和洗板机等设备，RCH的检测在中国还未能普遍开展。TORCH 感染在围产医学中称为TORCH综合症，由于孕妇, 胎儿和新生儿都易被感染, 它已受到全世界妇产科和儿科的极大重视。妊娠期感染不仅危害母体，往往还可对胎儿和新生儿产生严重影响。通过胎盘可引起子宫内感染而导致流产、早产、死胎或胎儿生长迟缓和畸形，通过产道和母乳可引起新生儿感染。如累及神经系统可造成不同程度的智力障碍以及各种瘫痪、失聪、失明等严重后遗症，影响人口素质，因而 TORCH 感染与优生优育有极为重要的关系。因此，RCH（IgG和gM）检查通常也称为优生优育十项检查。目前，TORCH的检测方法主要有放免（RIA）和酶免(EIA)。由于放免方法需要特殊仪器，且有放射危害，目前正被酶免（EIA）方法取代。EIA方法具有特异性强，灵敏度高，简单快速，成本低等优点，只要配备有酶标仪和其他相应的设备 ，多数普通实验室均可方便地开展 。 很显然, 尽快在计生系统普及酶标仪等设备是一个迫切的需求。

这项工作的落实将有助于提高诊治水平，降低母婴发病率，从而提高整个国民的健康素质。目前市场上提供的EIA试剂越来越多，如：T3、T4、TSH、TORCH 系列、不孕系列、各种癌症标志物、伤寒、副伤寒等，另外通过母婴传播的性传播疾病(如淋病、梅毒、HIV)和肝炎（如HBV、HCV)，以及胎儿的抗体，新生儿TSH的测定，疫苗反应等，市场上也都有成套 EIA 试剂盒供应。使用酶标仪有利于拓展检测项目，提高检测水平，其社会效益和 经济效益并举。

酶标仪单、双波长检测的比较

发布时间04年05月10日 13时59分

邹荣良

在用酶联免疫法测定抗原或抗体时，不论是定量试验还是定性试验都要求使用酶标仪进行测定。一般的酶标仪在测定中均有单波长和双波长的模式，并且采用的都是垂直光路。但在日常工作中有时会不太重视单波长和双波长的选择，对使用单、双波长给测定结果带来的较大差异也不很了解，并且实际工作中也出现了使用单波长检测导致抗HCV部分弱阳性的漏检。因此，本人就酶标仪在选择单、双波长使用方面谈谈个人的体会，供同道参考。

一 材料和方法

1.材料 由上海科华公司提供的乙肝表面抗原测定试剂盒；eppendorf 20-20ul的移液器。

2.仪器 上海科华公司的ST-360酶标仪和BIO-RAD 550酶标仪。

3.方法 底物液配制：底物液A、B各5ml混合，加入微量酶标记物，再加入5ml终止液，呈微，混匀待用；利用上海科华公司提供的乙肝表面抗原试剂盒的酶标板，用94孔中准确加入150ul配制好的上述底物液，另2孔中加入150ul已终止的空白底物液作空白。在BIO-RAD 550酶标仪上分别进行450nm单波长和450nm及655nm（无630nm）的双波长检测，在ST-360上分别进行450nm单波长和450nm及630nm的双波长检测吸光度各两次。

二 结果

1.分别对所得结果进行统计，发现单、双波长测定结果有较大的差异，双波长测定结果的CV值远小于单波长测定，结果见表1。

2.对ST-360两次重复测定结果进行分析，结果基本一致，见表2。

表1 酶标板吸光度在两台酶标仪上的测定统计结果

表2 ST-360酶标仪两次吸光度测定统计结果

三 讨论

1.酶标仪与分光光度计、自动生化分析仪等的吸光度测定有所不同，一般分光光度计是水平光路，而酶标仪则是垂直光路，但测定原理相同，都是使用朗伯-比耳定律，测定的都是样本的吸光度。垂直光的特点是标本吸光度受液体浓缩或稀释的影响小，不足之处是受被测样本液面是否水平、酶标板透光性、孔底是否平整等的影响较大。

2.酶标仪在用单波长测定吸光度时，除受到测定干扰（样本的浊度、干扰色等）和电路干扰（包括噪音、漂移、电压等）等因素外，受液体表面张力的影响也很大。在检测过程中，由于液体表面张力的作用，液体的表面不是一个平面，而是形成一个凹面，从侧面看似凹透镜，这样不可避免会影响光路的正常通过。由于凹液面的影响，光线在通过液体时，除正常被液体吸收一部分外，尚有部分被折射和反射（如光线通过凹透镜那样），影响吸光度的检测。而酶标仪使用的又是通过光导纤维传播的点光源，如果每次能在同一部位检测，吸光度的重复性将得到保证，但由于机械运动等造成的误差，不可能保证每孔都在相同部位被检测，因此造成了孔与孔之间有一定的差异。结果见表1，整块板单波长检测的CV在3%以上，吸光度最高值和最低值的相对误差达17%以上。

3.在双波长测定中，减少了测定干扰和电路干扰，因此测定结果明显好转，结果见表1，整块板样本的CV在2%以下。ST-360在进行稳定性观察中，如表2所示，两次检测结果基本一致，这表明ST-360的稳定性较好。同时，从表1也可以看到，科华公司生产的ST-360与BIO-RAD 550的检测结果一致，两者的检测性能基本相同。

4.由于液体表面张力的不同，导致单波长测定时的误差较大。并且用不同的洗涤剂会影响到最后加入底物和终止液后的液面情况，用加入表面活性剂的洗涤液清洗后，形成的液面更凹，对单波长检测的影响更大，并且与表面活性剂的浓度成正比。而且中性蒸馏水洗涤后，单、双波长检测的结果基本一致。

5.在酶联免疫法测定抗原抗体中，由于所使用的底物不论是邻苯二胺（OPD）-H2O2，还是四甲基联苯胺（TMB）-H2O2，显色终止后，在630nm和655nm处的吸光度值都只有吸收峰处（492nm/450nm）吸光度值的1%以下，因此，利用双波长检测，不会影响检测灵敏度。建立在进行酶联免疫检测时，酶标仪比色应该首选双波长。这样可以提高临界值处标本的分析正确度，减少实验误差。

酶标仪工作的原理是什么？

酶标仪原理是使抗原或抗体结合到某种固相载体表面，并保持其免疫活性。使抗原或抗体与某种酶连接成酶标抗原或抗体，这种酶标抗原或抗体既保留其免疫活性，又保留酶的活性。在测定时，把受检标本（测定其中的抗体或抗原）和酶标抗原或抗体按不同的步骤与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与其他物质分开，最后结合在固相载体上的酶量与标本中受检物质的量成一定的比例。加入酶反应的底物后，底物被酶催化变为有色产物，产物的量与标本中受检物质的量直接相关，故可根据颜色反应的深浅进行定性或定量分析。由于酶的催化频率很高，故可极大地放大反应效果，从而使测定方法达到很高的敏感度。

酶标仪原理的介绍

酶标仪实际上就是一台变相的专用光电比色计或分光光度计。是一种单通道自动进样的酶标仪工作原理图。光源灯发出的光波经过滤光片或单色器变成一束单色光，进入塑料微孔极中的待测标本，该单色光一部分被标本吸收，另一部分则透过标本照射到光电检测器上。光电检测器将透射过待测标本后强弱不同的光信号转换成相应的电信号，电信号经前置放大、对数放大、模数转换等处理后，送入微处理器进行数据处理，转换成相应的浓度，最后由显示器和打印机输出结果。.

酶联免疫检测仪的结构

规格有40孔板,55孔板,97孔板等多种,不同的仪器选用不同规格的孔板,对其可进行一孔

一孔地检测或一排一排地检测.

酶标仪所用的单色光既可通过相干滤光片来获得,也可用分光光度计相同的单色器来得

到.在使用滤光片作滤波装置时与普通比色计一样,滤光片即可放在微孔板的前面,也可放在

微孔板的后面,其效果是相同的.下图便是常用的酶标仪光路系统图.光源灯发出的光经

聚光镜,光栏后到达反射镜,经反射镜作90o反射后垂直通过比色溶液,然后再经滤光片送到

光电管.

从酶标仪工作框图和光路图上可看出,它和普通的光电比色计有以下几点差异:

(l)盛装待测比色液的容器不再使用比色皿,而是使用塑料微孔板.微孔板常用透明的

聚乙烯材料制成,对抗原抗体有较强的吸附作用,故用它作为固相载体.

(2)由于盛样本的塑料微孔板是多排多孔的,光线只能垂直穿过,因此酶标仪的光来都

是垂直通过待测溶液和微孔板的,光束既可是从上到下,也可以是从下到上穿过比色液.

(3)酶标仪通常不仅用A,有时也使用光密度OD来表示吸光度.

酶标仪可分为单通道和多通道2种类型,单通道又有自动和手动2种之分.自动型的仪器

有X,Y方向的机械驱动机构,可将微孔板L的小孔一个个依次送入光束下面测试,手动型则

靠手工移动微孔板来进行测量.

在单通道酶标仪的基础上又发展了多通道酶标仅,此类酶标仅一般都是自动化型的.它没

有多个光束和多个光电检测器,如 12个通道的仪器设有 12条光束或 12个光源,12个检测

器和12个放大器,在X方向的机械驱动装置的作用下,样品12个为一排被检测.多通道酶标

仪的检测速度快,但其结构较复杂价格也较高.

摘自《陕西医学检验》1998.13(4)12

摘要 为提高酶标仪检测结果的室内重复性和增强室间可比性，对已建立的酶标仪性能评价与鉴定的基本方法进行了详细解释和补充，以供同行在评价、鉴定仪器时参考与应用。

酶标仪开机后屏幕亮，但没有任何显示，是怎么回事

2.1酶标仪工作原理：光源发出的光经光栅或滤光片的作用，经调整使其达到我们需要的波长的光，一定波长的光通过各种有色溶液时，一部分波长的光被有色溶液吸收，而另一部分光通过溶液微孔条，而照射到光电检测器，光电检测器检测到的光信号与溶液所测物质含量即溶液的颜色成反比，溶液所测物质的含量越多，吸收光越强，而透光度越低，光电检测器检测到的信号再通过信号处理，经计算机控制运算，通过显示屏或打印机，呈现所检测数据结果，以供检测者分析。

2.2通过电脑显示问题分析，当我们通过正常开机，启动酶标仪和电脑，电脑屏幕显示几乎和往常一样，不注意的话系统很快通过自检，是很难看出问题所在，只有在我们设置好检测项目和技术参数后，放入酶标板，启动测试后，等待光源稳定的提示很短暂，几乎听不到走板声，并且酶标仪检测到主波长后很快就转到次波长，时间比往常明显缩短，显示检测结果的所有吸光度均为零，这是为什么？通过酶标仪与电脑链接线拔插检查和酶标仪工作原理分析，初步判断问题可能在酶标仪本身，而没在电脑显示和链接问题上。

2.3直接查看酶标仪，当打开电源，电源指示灯亮，说明供电正常，仔细查看酶标仪外壳各孔，均没见到有任何光源从孔里透射出来，用酶标仪直接测试，测试无法进行，屏幕均显示如上问题，见上图，根据酶标仪工作原理，分析问题可能出在光源和光源电路系统。

2.4综合分析处理：通过对以上两个问题的分析，最后推测问题可能出在酶标仪，经查阅酶标仪使用说明书，说明书列举的几项故障现象如：“灯泡不亮和光线过弱”和故障原因；“灯泡已损坏和灯泡损坏”及解决方案如；“更换灯泡”，结合酶标仪使用年限，进一步确定问题可能出在光源即灯泡不亮，用专用工具仔细打开酶标仪外壳，轻轻的取出酶标仪旧灯泡，用手拿住新灯泡的外部，切记一定不要用手接触到灯泡的内部，以免影响灯泡的发光，仔细察看把新灯泡对准原来灯泡的位置，固定好灯泡（如图2），盖上酶标仪外壳。打开电源，启动酶标仪电源开关，酶标仪自检顺利通过，没有出现前述如405nm波长空白太低等现象，在酶标仪上点击PC控制，与电脑链接，设置好检测项目参数，打开电脑的酶标测试系统软件，进行空板测试，电脑的屏幕显示待光源稳定，光源稳定后就顺利进入测试状态。

图2

2.5预实验 实验方法步骤条件与原来酶标仪故障前试验一致，用450/630nm双波长做HCV抗体检测，经检测阳性对照吸光度值为2.34、2.29，均≥0.5，阴性对照吸光度值为0.03、0.05、 0.00，均≤0.12，符合检测试剂的各项指标，与酶标仪没出现故障前试剂阴阳性对照测试结果一致，酶标仪故障排除。

3、体会

3.1酶标仪在计量认证的实验室属于需要检定的实验室仪器，已经出现故障，就应该贴上标签，不能再使用，只有维修好后重新检定合格后，方可使用，但在基层单位的实验室一台酶标仪，如果贴上标签，那就等于停下了这项工作，往往基层单位离维修厂家都很远，为一台小型酶标仪，很多厂家也是不乐意大老远跑来专门维修，增加费用。快递去厂家一来时间长，二是在运送过程中，可能会出现二次损坏，修好这个问题又会出现在那个问题，极不方便。

3.2基层单位的实验室标准化建设也不规范，检验设备也无法做到专人保管专人使用，人员的检验技术水平也是参差不齐，对仪器设备的知识了解不足，保养不到位，同样的仪器使用年限也不一样，检验仪器有些问题是通过现有的条件和人员技术水平、查看资料是可以解决，但有些问题需要更专业的技术人员，经过专业检测，找出问题，排除故障。

3.3 检验人员在日常工作中要做到“三要”；1、要用心，有时候在工作过程中出现的实验现象和设备故障，要用心去分析，查找问题所在，提出解决问题的方案和思路。2、要用手，找出故障所在，克服等、靠、要的思想，自己能解决的设备故障，就自己尽量动手去解决，排除故障提高工作效率。3、要说或讲，把解决的问题经验和想法，要讲出来。以便同事或同行指点，相互促进，取长补短，有利于工作的开展和提高。

虽然这些问题是其他检验同行中认为微不足道的问题，但对于我们的实验室来说，解决了日常工作中最迫切事情，使HIV、HCV和TP抗体得以顺利地进行检测，使检测结果更准确，更容易判读，更容易记录。暂停使用快速检验方法检测HIV，总之在检验工作中，检验设备就像检验人的眼睛和手臂。发现所检标本中的异常，真实的反应所检样品性状，为临床提供真实的临床检验数据，支持了临床医生对病人的疾病诊断和治疗评价。

酶标仪 怎么配置340nm滤光片

目前国内常见的ELISA试剂盒所使用的标记用酶均为辣根过氧化物酶（HRP），底物通常为四甲基联苯胺（TMB）和邻苯二胺（OPD），其在过氧化氢溶液的存在下，经HRP作用，分别氧化为2,2,-二氨基偶氮苯（DAB）和联苯醌。当pH值为5.0左右时，DAB在450nm波长处有最大吸收，当pH值降为L 0时，最大吸收波长移至492 nm,同时摩尔消光系数变大，显色加深，因而常用强酸如硫酸或盐酸终止反应。TMB的氧化产物联苯醌在波长450nm处有最大消光系数，如果HRP量少，H:O:和TMB过量时，则形成蓝色的阳离子根。降低pH,即可使蓝色的阳离子根转变为的联苯醌，使用硫酸作为终止剂可使产物稳定90min.因此，450nm和492 nm两个波长是目前ELISA测定最常用的。各种酶标仪都配有放置滤光片的可自动转换的部件，可以同时安装6~8片滤光片，所配备的滤光片均应包括上述两个波长，有的酶标仪以490nm滤光片替代492nm滤光片，影响不大 一般酶标仪的测定波长在400~750nm或800nm之间，完全可以满足ELISA的显色测定。。除了这两个基本滤光片外，考虑到双波长比色的需要，还应有620nm或630nm或650nm和405nm波长的滤光片，其他滤光片可根据自己的需要选择。有时，有的实验室希望用酶标仪作微量生化测定，故酶标仪生产厂家对其生产的酶标仪扩展了紫外检测功能，此时需要一个340nm波长滤光片。此时，酶标仪的测定波长范围就成为340-750nm或800nm。

酶标仪有单波长和双波长检测功能有时用户不知在什么情况下使用单或双波长检测。所谓的“单波长”就是使用一种对显色具最大吸收的波长即450 nm或492 nm进行比色测定；而“双波长”则除了用对显色具最大吸收的波长即450 nm或492 nm进行比色测定外，同时用对特异显色不敏感的波长如630 nm进行测定，酶标仪最后打印出来的吸光度则为二者之差。630 nm波长下得到的吸光度是非特异的，来自于板子上诸如指纹、灰尘、脏物等所致的吸收。因此，在ELISA比色测定中，最好使用双波长，且不必设空白孔。

酶标仪 基本结构

1、酶标仪主要由光源系统、单色器系统、样品室、探测器和微处理器控制系统等组成。

2、酶标仪即酶联免疫检测仪是酶联免疫吸附试验的专用仪器又称微孔板检测器。可简单地分为半自动和全自动2大类，但其工作原理基本上都是一致的，其核心都是一个比色计,即用比色法来进行分析。 测定一般要求测试液的最终体积在250μL以下，用一般光电比色计无法完成测试，因此对酶标仪中的光电比色计有特殊要求。

酶标仪的应用

酶标仪主要应用于酶联免疫吸附检测反应中检测吸光度值，其用途主要应用于ELISA试剂的测定，广泛用于各种实验室，包括临床实验室。

酶标仪测定原理是：在特定波长下，检测被测物的吸光值。

检测单位：

光通过被检测物，前后的能量差异即是被检测物吸收掉的能量，特定波长下，同一种被检测物的浓度与被吸收的能量成定量关系。

检测单位用OD值表示， OD是optical delnsity（光密度）的缩写，表示被检测物吸收掉的光密度， OD＝1og（1／trans），其中trans为检测物的透光值。根据Bouger-amberT-beer法则，OD值与光强度成下述关系：

E＝OD=logΙ0/Ι其中E表示被吸收的光密度， Ι0 为在检测物之前的光强度，Ι为从被检测物出来的光强度。

OD值由下述公式计算：

E＝OD=C×D×E

C为检测物的浓度

D为检测物的厚度

E为摩尔因子

在特定波长下测定每一种物质都有其特定的波长，在此波长下，此物质能够吸收最多的光能量。如果选择其它的波长段，就会造成检测结果的不准确。因此，在测定检测物时，我们选择特定的波长进行检测，称为测量波

长。

但是每一种物质对光能量还存在一定的非特异性吸收，为了消除这种非特异性吸收，我们再选取一个参照波长，以消除这个不准确性。在参照波长下，检测物光的吸收最小。检测波长和参照波长的吸光值之差可以消除非特异性吸收。

一般使用到酶标仪的主要是在食品安全药物残留快速检测中，例如配合北京望尔生物技术有限公司的克伦特罗、氯霉素、呋喃唑酮、呋喃它酮、呋喃妥因、磺胺类、氟喹诺酮类、链霉素、青霉素等残留快速检测ELISA试剂盒使用时，一般使用酶标仪来进行定量检测。如需建设实验室，望尔公司可以提供检测实验室的建设方案和相关详细建议。联系人：刘先生 010-89191492 邮箱：[email protected]

酶标仪的用途?

酶标仪可分为单通道和多通道2种类型，单通道又有自动和手动2种之分。自动型的仪器有X，Y方向的机械驱动机构，可将微孔板L的小孔一个个依次送入光束下面测试，手动型则靠手工移动微孔板来进行测量。

这是我们在科邦实验室平台搜集的资料，因为要买所以咨询过，您可以搜一下看看。在单通道酶标仪的基础上又发展了多通道酶标仪，此类酶标仪一般都是自动化型的。它设有多个光束和多个光电检测器，如12个通道的仪器设有12条光束或12个光，12个检测器和12个放大器，在X方向的机械驱动装置的作用下，样品12个为一排被检测。多通道酶标仪的检测速度快，但其结构较复杂价格也较高。

多功能酶标仪

多功能酶标仪指拥有多种检测模式的单体台式酶标仪。通常具有比色皿插槽，可检测吸光度(Abs)、荧光强度(FI)、时间分辨荧光(TRF)、荧光偏振(FP)、和化学发光(Lum)。可对以微孔板为体系的实验提供多种不同模式的检测。通常，多功能酶标仪至少可提供“吸收光”“、荧光”“、发光”三种不同的检测模式。一些中高端多功能酶标仪还可完成“时间分辨荧光”“、荧光偏振”“、荧光共振能量转移”等高级荧光检测实验。该仪器适用于临床检验、微生物学、流行病学、免疫学、内分泌学以及农林科学等领域。广泛用于医院、血站、防疫站、生物制品等部门。

酶标仪通过什么实现多通道分析

光学原理。

酶标仪通过光学原理进行多通道分析。它在检测过程中会利用光的波长来测量物质的吸收度或发射度，然后通过计算机软件对光谱分析数据进行处理和分析。因此，酶标仪能够同时分析多个样本，测量各个通道的信号强度并将其转化成数字信号，进行数据处理和质量控制。

通过光学原理，酶标仪实现了多通道分析和高灵敏度检测的能力，并广泛应用于生物学、生物医学和生物化学等领域，为科学研究和医学诊断提供了重要的技术手段。