多功能酶標儀插拔式濾光片原理

來源:趣味經驗館 1.66W

多功能酶標儀插拔式濾光片原理

多功能酶標儀插拔式濾光片的原理是基於不同材料和不同厚度的濾光片對特定波長的光線進行濾波或衰減。當激發光源照射到樣本中後,所得的熒光或吸收光在經過濾光片時,只會留下符合濾光片的通量。因此,更換不同波長的濾光片可以選擇特定區域內的熒光或吸收光,以檢測需要的訊號。在多功能酶標儀中,插拔式濾光片設有光路切換和自動識別功能,可以自動檢測濾光片的型別和數量,並根據選擇的檢測專案自動設定檢測波長,提高了檢測的準確性和效率。

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酶標儀原理_酶標儀使用說明

酶標儀的檢測原理

光是電磁波,波長100nm~400nm稱為紫外光, 400nm~780nm之間的光可被人眼觀察到,大於780nm稱為紅外光。人們只所以能夠看到色彩,是因為光照射到物體上被物體反射回來。綠色植物之所以是綠色,是因為植物吸收了光中的紅色光譜。酶標儀測定的原理是在特定波長下,檢測被測物的吸光值。

檢測單位:

光通過被檢測物,前後的能量差異即是被檢測物吸收掉的能量,特定波長下,同一種被檢測物的濃度與被吸收的能量成定量關係。

檢測單位用OD值表示, OD是optical delnsity(光密度)的縮寫,表示被檢測物吸收掉的光密度, OD=1og(1/trans),其中trans為檢測物的透光值。根據Bouger-amberT-beer法則,OD值與光強度成下述關係:

E=OD=logΙ0/Ι其中E表示被吸收的光密度, Ι0 為在檢測物之前的光強度,Ι為從被檢測物出來的光強度。

OD值由下述公式計算:

E=OD=C×D×E

C為檢測物的濃度

D為檢測物的厚度

E為摩爾因子

在特定波長下測定每一種物質都有其特定的波長,在此波長下,此物質能夠吸收最多的光能量。如果選擇其它的波長段,就會造成檢測結果的不準確。因此,在測定檢測物時,我們選擇特定的波長進行檢測,稱為測量波長。

但是每一種物質對光能量還存在一定的非特異性吸收,為了消除這種非特異性吸收,我們再選取一個參照波長,以消除這個不準確性。在參照波長下,檢測物光的吸收最小。檢測波長和參照波長的吸光值之差可以消除非特異性吸收。

Anthos 酶標儀檢測值計算

儀器中的檢測器接收透過被檢測物的光能量,轉換成二進位數字訊號,最大為4095。儀器定義沒有光源下的透光值為 0%,沒有檢測物的透光值為100%。則實際檢測中,檢測物的透光值均在 0%一100%之間。透光值

的計算如下:

T=(Meas—Min)/(Max—Min)

其中T為透光值, Meas為檢測的二進位數值, Min為在 0%的情況下檢測的二進位數值, Max為在100%的情況下檢測的二進位數值,舉例如下:

MaX=3600 Mn=20 Meas=30

T=(30-20)/3600-20)=0.0028

OD=1og(1/T)=1og(1/0.0028)=2.552

Anthos 酶標儀的中心定位

儀器會自動對酶標孔進行中心定位,中心定位是要消除酶標孔底的凸凹引起的厚薄不均帶來檢測的不準確。在對每一個酶標儀進行檢測時,儀器其實要進行35個點的測量,選取最中間的5個點的均值為本孔的OD值。

光源的參照通道

參照通道是用來校準由於電壓不穩或燈泡磨損帶來的影響。

酶標儀的用途和其它提示

用於ELISA試劑的測定,廣泛用於各種實驗室,包括臨床實驗室。

質量控制

質量控制是試劑檢測的重要因素。請按照試劑說明書的要求進行質量控制。 空白校正

有一些試劑盒的說陰書將空白孔設定為空氣,其它大多數空白孔的設定是用試劑來設定的,請按照試劑盒的說明書要求進行。

檢測結果的解釋

由於有相當多的因素會影響檢測的結果,如不同的酶標板,檢測試劑的體積,都會造成OD值的不,因此,只有使用同一酶標板反應的試劑檢測結果才能比較和分析。對結果的臨床解釋請依照試劑盒的說明書進行。

酶標儀的使用注意事項

1、工作環境

酶標儀是一種精密的光學儀器,因此良好的工作環境不僅能確保其準確性和穩定性,還能夠延長其使用壽命。根據DIN VDE 0871條例,儀器應放置在無磁場和干擾電壓的位置。依據DIN 45 635 -19條例:

儀器應放置在低於40分貝的環境下。

為延緩光學部件的老化,應避免陽光直射。

操作時環境溫度應在15℃-40℃之間,環境溼度在15%-85%之間。

操作電壓應保持穩定。

操作環境空氣清潔,避免水汽,煙塵。

保持乾燥、乾淨、水平的工作臺面,以及足夠的操作空間。

2、操作注意事項

酶標儀的功能是用來讀取酶聯免疫試劑盒的反應結果,因此要得到準確結果,試劑盒的使用必須規範。許多醫院在使用酶標儀之前是通過目測判斷結果,操作過程隨意性較大,在使用酶標儀後如果不能及時糾正操作習慣,會造成較大誤差。在酶標儀的操作中應注意以下事項:

使用加液器加液,加液頭不能混用。

洗板要洗乾淨。如果條件允許,使用洗板機洗板,避免交叉汙染。

嚴格按照試劑盒的說明書操作,反應時間準確。

在測量過程中,請勿碰酶標板,以防酶標板傳送時擠傷操作人員的手。

請勿將樣品或試劑灑到儀器表面或內部,操作完成後請洗手。

如果使用的樣品或試劑具有汙染性、毒性和生物學危害,請嚴格按照試

劑盒的操作說明,以防對操作人員造成損害。

如果儀器接觸過汙染性或傳染性物品,請進行清洗和消毒。

不要在測量過程中關閉電源。

對於因試劑盒問題造成的測量結果的偏差,應根據實際情況及時修改引數,以達到最佳效果。

使用後蓋好防塵罩。

出現技術故障時應及時與廠家聯絡,切勿擅自拆卸酶標儀。

酶標儀及洗板機選購指南

酶標儀(Microplate Reader)是對酶聯免疫檢測( EIA)實驗結果進行讀取和分析的專業儀器。酶聯免疫反應通過偶聯在抗原或抗體上的酶催化顯色底物進行的,反應結果以顏色顯示,通過顯色的深淺即吸光度值的大小就可以判斷標本中待測抗體或抗原的濃度。 酶標儀廣泛地應用在臨床檢驗、生物學研究、農業科學、食品和環境科學中,特別在近

幾年中,由於大量的酶聯免疫檢測試劑盒的應用,使得酶標儀在生殖保健領域中應用越來越廣泛,同時促進了生殖健康技術水平提高 。

目前國內許多計生站系統開展了酶免檢測專案,如:乙肝五項、愛滋病檢測、優生優 育系列檢測、激素檢測等。過去多數採用目測方法,報出的結果缺乏科學的依據。例如:某弓形蟲檢測試劑盒中,臨界值規定為:陰性對照品的 OD 值×2.5,通過目測無法判斷標本孔的反應顏色是否超過臨界值。肉眼進行兩孔之間的顏色比較可能還行,但比較一孔的顏色是否超過另一孔顏色的2.5倍就不可能。

國內多家權威機構,如衛生部臨床檢驗中心和計劃生育系統等多次強調酶標儀的重要性,並要求酶聯免疫檢測試劑應使用酶標儀判讀,酶免試劑的質控也應使用酶標儀,並提供酶標儀測定的原始資料,而各廠家的試劑盒說明書沒有是讓用目測的。同時酶免檢測的 專案往往是一些實質性的感染和病變(如:肝炎、愛滋病、優生優育等),判讀更要求嚴謹,由誤診引起的糾紛很難處理。另外,住院手術病人術前的丙肝、愛滋等 EIA 試劑檢測是避免因輸血引起感染引發的醫療事故糾紛的必要手段,正逐漸被許多單位所採用。

我國免疫診斷方法主要有如下三種:酶免(EIA)、放免(RIA)和發光,在市場上的情況如下:

方法 所處市場週期

放免 衰退期

酶免 成長期

發光 進入期

放免技術由於試劑的汙染和有效期等問題在國際和國內市場逐漸被淘汰,而化學發光試劑和裝置比較昂貴,使得其在國內的普及特別在計生系統普及需要較長時間,EIA 技術穩定,試劑價格合理,供應充,酶免技術在中國市場處於成長期,因此購買酶標儀正合適宜。 尤其要提到的是,在中國的計劃生育和婦幼保健系統配備酶標儀已經迫在眉睫。早在幾年以前, 世界衛生組織已建議對孕婦進行 TORCH五項常規篩查,但是遺憾的是由於缺乏酶標儀和洗板機等裝置,RCH的檢測在中國還未能普遍開展。TORCH 感染在圍產醫學中稱為TORCH綜合症,由於孕婦, 胎兒和新生兒都易被感染, 它已受到全世界婦產科和兒科的極大重視。妊娠期感染不僅危害母體,往往還可對胎兒和新生兒產生嚴重影響。通過胎盤可引起子宮內感染而導致流產、早產、死胎或胎兒生長遲緩和畸形,通過產道和母乳可引起新生兒感染。如累及神經系統可造成不同程度的智力障礙以及各種癱瘓、失聰、失明等嚴重後遺症,影響人口素質,因而 TORCH 感染與優生優育有極為重要的關係。因此,RCH(IgG和gM)檢查通常也稱為優生優育十項檢查。目前,TORCH的檢測方法主要有放免(RIA)和酶免(EIA)。由於放免方法需要特殊儀器,且有放射危害,目前正被酶免(EIA)方法取代。EIA方法具有特異性強,靈敏度高,簡單快速,成本低等優點,只要配備有酶標儀和其他相應的裝置 ,多數普通實驗室均可方便地開展 。 很顯然, 儘快在計生系統普及酶標儀等裝置是一個迫切的需求。

這項工作的落實將有助於提高診治水平,降低母嬰發病率,從而提高整個國民的健康素質。目前市場上提供的EIA試劑越來越多,如:T3、T4、TSH、TORCH 系列、不孕系列、各種癌症標誌物、傷寒、副傷寒等,另外通過母嬰傳播的性傳播疾病(如淋病、梅毒、HIV)和肝炎(如HBV、HCV),以及胎兒的抗體,新生兒TSH的測定,疫苗反應等,市場上也都有成套 EIA 試劑盒供應。使用酶標儀有利於拓展檢測專案,提高檢測水平,其社會效益和 經濟效益並舉。

酶標儀單、雙波長檢測的比較

釋出時間04年05月10日 13時59分

鄒榮良

在用酶聯免疫法測定抗原或抗體時,不論是定量試驗還是定性試驗都要求使用酶標儀進行測定。一般的酶標儀在測定中均有單波長和雙波長的模式,並且採用的都是垂直光路。但在日常工作中有時會不太重視單波長和雙波長的選擇,對使用單、雙波長給測定結果帶來的較大差異也不很瞭解,並且實際工作中也出現了使用單波長檢測導致抗HCV部分弱陽性的漏檢。因此,本人就酶標儀在選擇單、雙波長使用方面談談個人的體會,供同道參考。

一 材料和方法

1.材料 由上海科華公司提供的乙肝表面抗原測定試劑盒;eppendorf 20-20ul的移液器。

2.儀器 上海科華公司的ST-360酶標儀和BIO-RAD 550酶標儀。

3.方法 底物液配製:底物液A、B各5ml混合,加入微量酶標記物,再加入5ml終止液,呈微,混勻待用;利用上海科華公司提供的乙肝表面抗原試劑盒的酶標板,用94孔中準確加入150ul配製好的上述底物液,另2孔中加入150ul已終止的空白底物液作空白。在BIO-RAD 550酶標儀上分別進行450nm單波長和450nm及655nm(無630nm)的雙波長檢測,在ST-360上分別進行450nm單波長和450nm及630nm的雙波長檢測吸光度各兩次。

二 結果

1.分別對所得結果進行統計,發現單、雙波長測定結果有較大的差異,雙波長測定結果的CV值遠小於單波長測定,結果見表1。

2.對ST-360兩次重複測定結果進行分析,結果基本一致,見表2。

表1 酶標板吸光度在兩臺酶標儀上的測定統計結果

表2 ST-360酶標儀兩次吸光度測定統計結果

三 討論

1.酶標儀與分光光度計、自動生化分析儀等的吸光度測定有所不同,一般分光光度計是水平光路,而酶標儀則是垂直光路,但測定原理相同,都是使用朗伯-比耳定律,測定的都是樣本的吸光度。垂直光的特點是標本吸光度受液體濃縮或稀釋的影響小,不足之處是受被測樣本液麵是否水平、酶標板透光性、孔底是否平整等的影響較大。

2.酶標儀在用單波長測定吸光度時,除受到測定干擾(樣本的濁度、干擾色等)和電路干擾(包括噪音、漂移、電壓等)等因素外,受液體表面張力的影響也很大。在檢測過程中,由於液體表面張力的作用,液體的表面不是一個平面,而是形成一個凹面,從側面看似凹透鏡,這樣不可避免會影響光路的正常通過。由於凹液麵的影響,光線在通過液體時,除正常被液體吸收一部分外,尚有部分被折射和反射(如光線通過凹透鏡那樣),影響吸光度的檢測。而酶標儀使用的又是通過光導纖維傳播的點光源,如果每次能在同一部位檢測,吸光度的重複性將得到保證,但由於機械運動等造成的誤差,不可能保證每孔都在相同部位被檢測,因此造成了孔與孔之間有一定的差異。結果見表1,整塊板單波長檢測的CV在3%以上,吸光度最高值和最低值的相對誤差達17%以上。

3.在雙波長測定中,減少了測定干擾和電路干擾,因此測定結果明顯好轉,結果見表1,整塊板樣本的CV在2%以下。ST-360在進行穩定性觀察中,如表2所示,兩次檢測結果基本一致,這表明ST-360的穩定性較好。同時,從表1也可以看到,科華公司生產的ST-360與BIO-RAD 550的檢測結果一致,兩者的檢測效能基本相同。

4.由於液體表面張力的不同,導致單波長測定時的誤差較大。並且用不同的洗滌劑會影響到最後加入底物和終止液後的液麵情況,用加入表面活性劑的洗滌液清洗後,形成的液麵更凹,對單波長檢測的影響更大,並且與表面活性劑的濃度成正比。而且中性蒸餾水洗滌後,單、雙波長檢測的結果基本一致。

5.在酶聯免疫法測定抗原抗體中,由於所使用的底物不論是鄰苯二胺(OPD)-H2O2,還是四甲基聯苯胺(TMB)-H2O2,顯色終止後,在630nm和655nm處的吸光度值都只有吸收峰處(492nm/450nm)吸光度值的1%以下,因此,利用雙波長檢測,不會影響檢測靈敏度。建立在進行酶聯免疫檢測時,酶標儀比色應該首選雙波長。這樣可以提高臨界值處標本的分析正確度,減少實驗誤差。

酶標儀工作的原理是什麼?

酶標儀原理是使抗原或抗體結合到某種固相載體表面,並保持其免疫活性。使抗原或抗體與某種酶連線成酶標抗原或抗體,這種酶標抗原或抗體既保留其免疫活性,又保留酶的活性。在測定時,把受檢標本(測定其中的抗體或抗原)和酶標抗原或抗體按不同的步驟與固相載體表面的抗原或抗體起反應。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體複合物與其他物質分開,最後結合在固相載體上的酶量與標本中受檢物質的量成一定的比例。加入酶反應的底物後,底物被酶催化變為有色產物,產物的量與標本中受檢物質的量直接相關,故可根據顏色反應的深淺進行定性或定量分析。由於酶的催化頻率很高,故可極大地放大反應效果,從而使測定方法達到很高的敏感度。

酶標儀原理的介紹

酶標儀實際上就是一臺變相的專用光電比色計或分光光度計。是一種單通道自動進樣的酶標儀工作原理圖。光源燈發出的光波經過濾光片或單色器變成一束單色光,進入塑料微孔極中的待測標本,該單色光一部分被標本吸收,另一部分則透過標本照射到光電檢測器上。光電檢測器將透射過待測標本後強弱不同的光訊號轉換成相應的電訊號,電訊號經前置放大、對數放大、模數轉換等處理後,送入微處理器進行資料處理,轉換成相應的濃度,最後由顯示器和印表機輸出結果。.

酶聯免疫檢測儀的結構

規格有40孔板,55孔板,97孔板等多種,不同的儀器選用不同規格的孔板,對其可進行一孔

一孔地檢測或一排一排地檢測.

酶標儀所用的單色光既可通過相干濾光片來獲得,也可用分光光度計相同的單色器來得

到.在使用濾光片作濾波裝置時與普通比色計一樣,濾光片即可放在微孔板的前面,也可放在

微孔板的後面,其效果是相同的.下圖便是常用的酶標儀光路系統圖.光源燈發出的光經

聚光鏡,光欄後到達反射鏡,經反射鏡作90o反射後垂直通過比色溶液,然後再經濾光片送到

光電管.

從酶標儀工作框圖和光路圖上可看出,它和普通的光電比色計有以下幾點差異:

(l)盛裝待測比色液的容器不再使用比色皿,而是使用塑料微孔板.微孔板常用透明的

聚乙烯材料製成,對抗原抗體有較強的吸附作用,故用它作為固相載體.

(2)由於盛樣本的塑料微孔板是多排多孔的,光線只能垂直穿過,因此酶標儀的光來都

是垂直通過待測溶液和微孔板的,光束既可是從上到下,也可以是從下到上穿過比色液.

(3)酶標儀通常不僅用A,有時也使用光密度OD來表示吸光度.

酶標儀可分為單通道和多通道2種類型,單通道又有自動和手動2種之分.自動型的儀器

有X,Y方向的機械驅動機構,可將微孔板L的小孔一個個依次送入光束下面測試,手動型則

靠手工移動微孔板來進行測量.

在單通道酶標儀的基礎上又發展了多通道酶標僅,此類酶標僅一般都是自動化型的.它沒

有多個光束和多個光電檢測器,如 12個通道的儀器設有 12條光束或 12個光源,12個檢測

器和12個放大器,在X方向的機械驅動裝置的作用下,樣品12個為一排被檢測.多通道酶標

儀的檢測速度快,但其結構較複雜價格也較高.

摘自《陝西醫學檢驗》1998.13(4)12

摘要 為提高酶標儀檢測結果的室內重複性和增強室間可比性,對已建立的酶標儀性能評價與鑑定的基本方法進行了詳細解釋和補充,以供同行在評價、鑑定儀器時參考與應用。

酶標儀開機後螢幕亮,但沒有任何顯示,是怎麼回事

2.1酶標儀工作原理:光源發出的光經光柵或濾光片的作用,經調整使其達到我們需要的波長的光,一定波長的光通過各種有色溶液時,一部分波長的光被有色溶液吸收,而另一部分光通過溶液微孔條,而照射到光電檢測器,光電檢測器檢測到的光訊號與溶液所測物質含量即溶液的顏色成反比,溶液所測物質的含量越多,吸收光越強,而透光度越低,光電檢測器檢測到的訊號再通過訊號處理,經計算機控制運算,通過顯示屏或印表機,呈現所檢測資料結果,以供檢測者分析。

2.2通過電腦顯示問題分析,當我們通過正常開機,啟動酶標儀和電腦,電腦螢幕顯示幾乎和往常一樣,不注意的話系統很快通過自檢,是很難看出問題所在,只有在我們設定好檢測專案和技術引數後,放入酶標板,啟動測試後,等待光源穩定的提示很短暫,幾乎聽不到走板聲,並且酶標儀檢測到主波長後很快就轉到次波長,時間比往常明顯縮短,顯示檢測結果的所有吸光度均為零,這是為什麼?通過酶標儀與電腦連結線拔插檢查和酶標儀工作原理分析,初步判斷問題可能在酶標儀本身,而沒在電腦顯示和連結問題上。

2.3直接檢視酶標儀,當開啟電源,電源指示燈亮,說明供電正常,仔細檢視酶標儀外殼各孔,均沒見到有任何光源從孔裡透射出來,用酶標儀直接測試,測試無法進行,螢幕均顯示如上問題,見上圖,根據酶標儀工作原理,分析問題可能出在光源和光源電路系統。

2.4綜合分析處理:通過對以上兩個問題的分析,最後推測問題可能出在酶標儀,經查閱酶標儀使用說明書,說明書列舉的幾項故障現象如:“燈泡不亮和光線過弱”和故障原因;“燈泡已損壞和燈泡損壞”及解決方案如;“更換燈泡”,結合酶標儀使用年限,進一步確定問題可能出在光源即燈泡不亮,用專用工具仔細開啟酶標儀外殼,輕輕的取出酶標儀舊燈泡,用手拿住新燈泡的外部,切記一定不要用手接觸到燈泡的內部,以免影響燈泡的發光,仔細察看把新燈泡對準原來燈泡的位置,固定好燈泡(如圖2),蓋上酶標儀外殼。開啟電源,啟動酶標儀電源開關,酶標儀自檢順利通過,沒有出現前述如405nm波長空白太低等現象,在酶標儀上點選PC控制,與電腦連結,設定好檢測專案引數,開啟電腦的酶標測試系統軟體,進行空板測試,電腦的螢幕顯示待光源穩定,光源穩定後就順利進入測試狀態。

圖2

2.5預實驗 實驗方法步驟條件與原來酶標儀故障前試驗一致,用450/630nm雙波長做HCV抗體檢測,經檢測陽性對照吸光度值為2.34、2.29,均≥0.5,陰性對照吸光度值為0.03、0.05、 0.00,均≤0.12,符合檢測試劑的各項指標,與酶標儀沒出現故障前試劑陰陽性對照測試結果一致,酶標儀故障排除。

3、體會

3.1酶標儀在計量認證的實驗室屬於需要檢定的實驗室儀器,已經出現故障,就應該貼上標籤,不能再使用,只有維修好後重新檢定合格後,方可使用,但在基層單位的實驗室一臺酶標儀,如果貼上標籤,那就等於停下了這項工作,往往基層單位離維修廠家都很遠,為一臺小型酶標儀,很多廠家也是不樂意大老遠跑來專門維修,增加費用。快遞去廠家一來時間長,二是在運送過程中,可能會出現二次損壞,修好這個問題又會出現在那個問題,極不方便。

3.2基層單位的實驗室標準化建設也不規範,檢驗裝置也無法做到專人保管專人使用,人員的檢驗技術水平也是參差不齊,對儀器裝置的知識瞭解不足,保養不到位,同樣的儀器使用年限也不一樣,檢驗儀器有些問題是通過現有的條件和人員技術水平、檢視資料是可以解決,但有些問題需要更專業的技術人員,經過專業檢測,找出問題,排除故障。

3.3 檢驗人員在日常工作中要做到“三要”;1、要用心,有時候在工作過程中出現的實驗現象和裝置故障,要用心去分析,查詢問題所在,提出解決問題的方案和思路。2、要用手,找出故障所在,克服等、靠、要的思想,自己能解決的裝置故障,就自己儘量動手去解決,排除故障提高工作效率。3、要說或講,把解決的問題經驗和想法,要講出來。以便同事或同行指點,相互促進,取長補短,有利於工作的開展和提高。

雖然這些問題是其他檢驗同行中認為微不足道的問題,但對於我們的實驗室來說,解決了日常工作中最迫切事情,使HIV、HCV和TP抗體得以順利地進行檢測,使檢測結果更準確,更容易判讀,更容易記錄。暫停使用快速檢驗方法檢測HIV,總之在檢驗工作中,檢驗裝置就像檢驗人的眼睛和手臂。發現所檢標本中的異常,真實的反應所檢樣品性狀,為臨床提供真實的臨床檢驗資料,支援了臨床醫生對病人的疾病診斷和治療評價。

酶標儀 怎麼配置340nm濾光片

目前國內常見的ELISA試劑盒所使用的標記用酶均為辣根過氧化物酶(HRP),底物通常為四甲基聯苯胺(TMB)和鄰苯二胺(OPD),其在過氧化氫溶液的存在下,經HRP作用,分別氧化為2,2,-二氨基偶氮苯(DAB)和聯苯醌。當pH值為5.0左右時,DAB在450nm波長處有最大吸收,當pH值降為L 0時,最大吸收波長移至492 nm,同時摩爾消光係數變大,顯色加深,因而常用強酸如硫酸或鹽酸終止反應。TMB的氧化產物聯苯醌在波長450nm處有最大消光係數,如果HRP量少,H:O:和TMB過量時,則形成藍色的陽離子根。降低pH,即可使藍色的陽離子根轉變為的聯苯醌,使用硫酸作為終止劑可使產物穩定90min.因此,450nm和492 nm兩個波長是目前ELISA測定最常用的。各種酶標儀都配有放置濾光片的可自動轉換的部件,可以同時安裝6~8片濾光片,所配備的濾光片均應包括上述兩個波長,有的酶標儀以490nm濾光片替代492nm濾光片,影響不大 一般酶標儀的測定波長在400~750nm或800nm之間,完全可以滿足ELISA的顯色測定。。除了這兩個基本濾光片外,考慮到雙波長比色的需要,還應有620nm或630nm或650nm和405nm波長的濾光片,其他濾光片可根據自己的需要選擇。有時,有的實驗室希望用酶標儀作微量生化測定,故酶標儀生產廠家對其生產的酶標儀擴充套件了紫外檢測功能,此時需要一個340nm波長濾光片。此時,酶標儀的測定波長範圍就成為340-750nm或800nm。

酶標儀有單波長和雙波長檢測功能有時使用者不知在什麼情況下使用單或雙波長檢測。所謂的“單波長”就是使用一種對顯色具最大吸收的波長即450 nm或492 nm進行比色測定;而“雙波長”則除了用對顯色具最大吸收的波長即450 nm或492 nm進行比色測定外,同時用對特異顯色不敏感的波長如630 nm進行測定,酶標儀最後打印出來的吸光度則為二者之差。630 nm波長下得到的吸光度是非特異的,來自於板子上諸如指紋、灰塵、髒物等所致的吸收。因此,在ELISA比色測定中,最好使用雙波長,且不必設空白孔。

酶標儀 基本結構

1、酶標儀主要由光源系統、單色器系統、樣品室、探測器和微處理器控制系統等組成。

2、酶標儀即酶聯免疫檢測儀是酶聯免疫吸附試驗的專用儀器又稱微孔板檢測器。可簡單地分為半自動和全自動2大類,但其工作原理基本上都是一致的,其核心都是一個比色計,即用比色法來進行分析。 測定一般要求測試液的最終體積在250μL以下,用一般光電比色計無法完成測試,因此對酶標儀中的光電比色計有特殊要求。

酶標儀的應用

酶標儀主要應用於酶聯免疫吸附檢測反應中檢測吸光度值,其用途主要應用於ELISA試劑的測定,廣泛用於各種實驗室,包括臨床實驗室。

酶標儀測定原理是:在特定波長下,檢測被測物的吸光值。

檢測單位:

光通過被檢測物,前後的能量差異即是被檢測物吸收掉的能量,特定波長下,同一種被檢測物的濃度與被吸收的能量成定量關係。

檢測單位用OD值表示, OD是optical delnsity(光密度)的縮寫,表示被檢測物吸收掉的光密度, OD=1og(1/trans),其中trans為檢測物的透光值。根據Bouger-amberT-beer法則,OD值與光強度成下述關係:

E=OD=logΙ0/Ι其中E表示被吸收的光密度, Ι0 為在檢測物之前的光強度,Ι為從被檢測物出來的光強度。

OD值由下述公式計算:

E=OD=C×D×E

C為檢測物的濃度

D為檢測物的厚度

E為摩爾因子

在特定波長下測定每一種物質都有其特定的波長,在此波長下,此物質能夠吸收最多的光能量。如果選擇其它的波長段,就會造成檢測結果的不準確。因此,在測定檢測物時,我們選擇特定的波長進行檢測,稱為測量波

長。

但是每一種物質對光能量還存在一定的非特異性吸收,為了消除這種非特異性吸收,我們再選取一個參照波長,以消除這個不準確性。在參照波長下,檢測物光的吸收最小。檢測波長和參照波長的吸光值之差可以消除非特異性吸收。

一般使用到酶標儀的主要是在食品安全藥物殘留快速檢測中,例如配合北京望爾生物技術有限公司的克倫特羅、氯黴素、呋喃唑酮、呋喃它酮、呋喃妥因、磺胺類、氟喹諾酮類、鏈黴素、青黴素等殘留快速檢測ELISA試劑盒使用時,一般使用酶標儀來進行定量檢測。如需建設實驗室,望爾公司可以提供檢測實驗室的建設方案和相關詳細建議。聯絡人:劉先生 010-89191492 郵箱:[email protected]

酶標儀的用途?

酶標儀可分為單通道和多通道2種類型,單通道又有自動和手動2種之分。自動型的儀器有X,Y方向的機械驅動機構,可將微孔板L的小孔一個個依次送入光束下面測試,手動型則靠手工移動微孔板來進行測量。

這是我們在科邦實驗室平臺蒐集的資料,因為要買所以諮詢過,您可以搜一下看看。在單通道酶標儀的基礎上又發展了多通道酶標儀,此類酶標儀一般都是自動化型的。它設有多個光束和多個光電檢測器,如12個通道的儀器設有12條光束或12個光,12個檢測器和12個放大器,在X方向的機械驅動裝置的作用下,樣品12個為一排被檢測。多通道酶標儀的檢測速度快,但其結構較複雜價格也較高。

多功能酶標儀

多功能酶標儀指擁有多種檢測模式的單體臺式酶標儀。通常具有比色皿插槽,可檢測吸光度(Abs)、熒光強度(FI)、時間分辨熒光(TRF)、熒光偏振(FP)、和化學發光(Lum)。可對以微孔板為體系的實驗提供多種不同模式的檢測。通常,多功能酶標儀至少可提供“吸收光”“、熒光”“、發光”三種不同的檢測模式。一些中高階多功能酶標儀還可完成“時間分辨熒光”“、熒光偏振”“、熒光共振能量轉移”等高階熒光檢測實驗。該儀器適用於臨床檢驗、微生物學、流行病學、免疫學、內分泌學以及農林科學等領域。廣泛用於醫院、血站、防疫站、生物製品等部門。

酶標儀通過什麼實現多通道分析

光學原理。

酶標儀通過光學原理進行多通道分析。它在檢測過程中會利用光的波長來測量物質的吸收度或發射度,然後通過計算機軟體對光譜分析資料進行處理和分析。因此,酶標儀能夠同時分析多個樣本,測量各個通道的訊號強度並將其轉化成數字訊號,進行資料處理和質量控制。

通過光學原理,酶標儀實現了多通道分析和高靈敏度檢測的能力,並廣泛應用於生物學、生物醫學和生物化學等領域,為科學研究和醫學診斷提供了重要的技術手段。

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